為使水稻獲得抗除草劑性狀,科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入水稻植株,獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻。
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注:GUS基因表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)染色能從無色變成藍(lán)色
(1)取某品種水稻的幼胚,先進(jìn)行 消毒消毒處理,然后接種到培養(yǎng)基中,水稻幼胚細(xì)胞生 脫分化脫分化形成愈傷組織。用含基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌侵染該愈傷組織。
(2)用 CaCl2CaCl2處理農(nóng)桿菌后獲得 感受態(tài)感受態(tài)細(xì)胞,將與基因表達(dá)載體混合完成轉(zhuǎn)化后,在添加 潮霉素潮霉素的培養(yǎng)基中,經(jīng)篩選1得到含基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌。
(3)將草甘膦抗性基因作為 目的基因目的基因,與Ti質(zhì)粒用相同的 限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶處理構(gòu)建基因表達(dá)載體。
(4)除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外,還可以利用GUS基因表達(dá)產(chǎn)物的鑒定進(jìn)行圖中的篩選2,以確定目的基因是否 表達(dá)表達(dá)。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過細(xì)胞的 再分化再分化過程,獲得轉(zhuǎn)基因水稻。
(5)為獲得具有抗除草劑性狀的轉(zhuǎn)基因水稻,還需要在個體水平進(jìn)行抗性測試。請你設(shè)計一個實驗方案,篩選出對草甘膦具有抗性的轉(zhuǎn)基因水稻。 選取長勢相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻,用等量相同濃度的草甘磷農(nóng)藥噴灑,相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時間后,觀測水稻的生長情況。選取可以正常生長的水稻,即為轉(zhuǎn)基因成功的水稻選取長勢相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻,用等量相同濃度的草甘磷農(nóng)藥噴灑,相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時間后,觀測水稻的生長情況。選取可以正常生長的水稻,即為轉(zhuǎn)基因成功的水稻。
【考點】基因工程的操作過程綜合;植物的組織培養(yǎng).
【答案】消毒;脫分化;CaCl2;感受態(tài);潮霉素;目的基因;限制性核酸內(nèi)切酶;表達(dá);再分化;選取長勢相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻,用等量相同濃度的草甘磷農(nóng)藥噴灑,相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時間后,觀測水稻的生長情況。選取可以正常生長的水稻,即為轉(zhuǎn)基因成功的水稻
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:2引用:1難度:0.6
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