抗體的基因工程改造經(jīng)歷了最早期的人鼠嵌合單抗、人源化單抗,以及近年來的完全人源化單抗3個發(fā)展階段。
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鼠源單抗人-鼠嵌合單抗人源化單抗完全人源化單抗
請回答:
(1)人-鼠嵌合單抗是通過從雜交瘤雜交瘤細胞中提取總RNA,在逆轉錄逆轉錄酶的作用下形成互補DNA,然后以此DNA為模板擴增得到功能性可變區(qū)基因,再與人抗體支架區(qū)基因通過DNA連接酶DNA連接酶連接,插入適當表達載體,轉染宿主細胞表達產(chǎn)生。
(2)人源化單抗技術主要是通過基因工程的方法將鼠源抗體的識別抗原分子的特殊部分識別抗原分子的特殊部分,即互補決定區(qū)組裝到人源抗體的支架區(qū)。該技術的缺點之一,在進行人源化改造之前,必須先制備出鼠源性抗某一特定抗原的單克隆抗體單克隆抗體。
(3)完全人源化單抗包括噬菌體展示庫技術和轉基因鼠技術。噬菌體展示抗體庫技術:將人類抗體基因文庫基因文庫序列用PCRPCR技術擴增出來后插入到噬菌體蛋白的編碼基因中,使抗體與噬菌體外殼蛋白形成融合蛋白而被展示到噬菌體表面(可展示針對幾乎所有抗原的人源性抗體)。完全人抗體的制備則是來源于轉基因小鼠:主要操作是通過基因敲除基因敲除技術將小鼠自身的抗體編碼基因替換為人類抗體編碼基因,而小鼠免疫系統(tǒng)中的其他功能組件并不受影響。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】雜交瘤;逆轉錄;DNA連接酶;識別抗原分子的特殊部分;單克隆抗體;基因文庫;PCR;基因敲除
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:2難度:0.7
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