孔雀石綠（簡稱MG）是廣泛使用的有機(jī)染料，在自然環(huán)境中極難降解，容易引起土壤污染，進(jìn)而危害人體健康。因此從土壤中分離和篩選出高效的MG降解菌有非常重要的意義。已知MG在水中溶解度低，含過量MG的固體培養(yǎng)基不透明。
（1）培養(yǎng)基的配制：MG降解菌富集培養(yǎng)基需含有NaH2PO4、KH2PO4、NaCl、NH4Cl、CaCl2、MgSO4、水等，再加 孔雀石綠（MG）孔雀石綠（MG）作為唯一碳源。配制好的培養(yǎng)基，需用 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。
（2）MG高效降解菌株的分離和純化：圖中所示的分離純化細(xì)菌的方法是 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法，用該方法統(tǒng)計樣品的菌落數(shù)目比活菌的實際數(shù)目 少少（“少”或“多”），原因是 當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。實驗室采用此方法，將1mL樣品稀釋1000倍，在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)正確操作培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為150、158和160．據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)至少為 1.56×1091.56×109個。
（3）黑曲霉是一種絲狀真菌，黑曲霉的PDA液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基組成為：麩皮、豆粉餅、（NH4）2SO4、MgSO4?7H2O、KH2PO4，培養(yǎng)時需要通氣振蕩。豆粉餅可提供黑曲霉生長所需的 碳源和氮源碳源和氮源；若要分離黑曲霉菌落，上述培養(yǎng)基中還需要添加 瓊脂瓊脂，在培養(yǎng)基滅菌前需將pH調(diào)至 酸性酸性（填“酸性”“中性”或“堿性”）。
（4）計數(shù)黑曲霉菌液孢子濃度的方法為：用多層紗布過濾黑曲霉培養(yǎng)液得到孢子懸浮液，取1mL懸浮液用無菌水逐級稀釋104倍，再取稀釋液滴加至血細(xì)胞計數(shù)板（規(guī)格為1mm×1mm×0.1mm,由400個小格組成）進(jìn)行計數(shù)，統(tǒng)計得到計數(shù)的小格中平均孢子數(shù)2個，則黑曲霉培養(yǎng)液中孢子濃度為為 8×10108×1010個mL-1。
（5）以大豆為主要原料，利用黑曲霉產(chǎn)生的蛋白酶可將原料中的蛋白質(zhì)水解成 小分子肽和氨基酸小分子肽和氨基酸，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制可得到醬油。
【答案】孔雀石綠（MG）；高壓蒸汽滅菌；稀釋涂布平板法；少；當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落；1.56×109；碳源和氮源；瓊脂；酸性；8×1010；小分子肽和氨基酸
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/26 8:0:9組卷：6引用：2難度：0.6
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1．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對其計數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
2．回答下列關(guān)于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細(xì)胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細(xì)胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細(xì)胞膜 B．核糖體 C．?dāng)M核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測定結(jié)果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進(jìn)行測定．
表 試驗用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌，并了解其生長規(guī)律，進(jìn)行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細(xì)菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細(xì)菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細(xì)菌：將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細(xì)菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間），馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細(xì)菌的核糖體．
（4）探究生長規(guī)律：在計數(shù)時，計數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)時，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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