酵母菌絮凝是指菌體細胞間通過細胞壁相互粘附、聚集成團的現(xiàn)象。適當提高酵母的絮凝能力，有助于發(fā)酵后細胞和產物的分離，節(jié)約生產成本?？蒲腥藛T為研究R基因對酵母菌絮凝性能的影響，用基因工程技術獲得了R基因被敲除的酵母菌菌株，主要步驟如圖1（G418為一種氨基糖苷類抗生素）。據(jù)圖回答：
（1）過程①，引物2和引物4分別添加了MluⅠ的識別序列，則引物1和引物3的5'端分別添加 BamHⅠ、HindⅢBamHⅠ、HindⅢ的識別序列，PCR獲取R基因左右兩端的N和C片段過程中，除圖中條件外，還需提供 dNTP、Taq酶、緩沖液、Mg2+dNTP、Taq酶、緩沖液、Mg2+等條件（至少寫三個）。
（2）利用含 G418G418的培養(yǎng)基篩選出重組酵母，再挑取單菌落進行PCR擴增，驗證酵母細胞R基因是否被敲除，則擴增時選擇引物組合是 引物1和引物3引物1和引物3。
（3）科研人員繼續(xù)將野生酵母菌和R基因敲除酵母菌的菌液接種到裝有麥芽汁的錐形瓶中，一定條件下靜置發(fā)酵7天，測定酒精發(fā)酵能力和絮凝能力，結果如下表。
| 指標種類 | 酒精發(fā)酵能力 | 絮凝能力 |
| 野生酵母菌 | 4.5% | 63.1% |
| R基因敲除酵母菌 | 4.5% | 83.1% |
密封
密封
條件和定期排氣。②實驗結果表明，R基因敲除酵母菌是否符合生產需求？請說出你的判斷依據(jù)。
符合，R基因敲除后酵母菌的發(fā)酵能力不變，而絮凝能力增強
符合，R基因敲除后酵母菌的發(fā)酵能力不變，而絮凝能力增強
。（4）科研人員又將不同濃度梯度的R基因敲除酵母菌菌液和野生酵母菌菌液點樣于含30g/mL鈣熒光白（細胞壁抑制劑，破壞細胞壁的正常組裝）的YPD培養(yǎng)基上，結果如圖2。推測R基因敲除酵母菌絮凝能力變化的原因是
R基因缺失增強了酵母菌對細胞壁抑制劑的耐性，絮凝能力增強
R基因缺失增強了酵母菌對細胞壁抑制劑的耐性，絮凝能力增強
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BamHⅠ、HindⅢ；dNTP、Taq酶、緩沖液、Mg2+；G418；引物1和引物3；密封；符合，R基因敲除后酵母菌的發(fā)酵能力不變，而絮凝能力增強；R基因缺失增強了酵母菌對細胞壁抑制劑的耐性，絮凝能力增強
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/8/2 8:0:9組卷：4引用：2難度：0.6
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6