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[選修3:現(xiàn)代生物科技專題]
研究發(fā)現(xiàn),某些植物的種子脫水?dāng)?shù)十年后復(fù)水仍能夠恢復(fù)活性,原因是細(xì)胞中積累了海藻糖??蒲腥藛T擬將酵母菌的海藻糖合成酶基因(TPS)轉(zhuǎn)入小麥中。如圖中標(biāo)注了載體、Bar體記基因(抗除草劑基因)、TPS基因的酶切位點和預(yù)期的基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)。
科研人員利用PCR技術(shù)獲得大量的TPS基因?,F(xiàn)將2種引物的一側(cè)添加限制酶識別序列(表格列舉了限制酶的識別序列),這樣TPS基因的PCR產(chǎn)物和載體用相同的限制酶切制后,可利用DNA連接酶將TPS基因拼接到載體的切口處,形成基因表達(dá)載體。
BamHⅠ SacⅠ HindⅢ XbaⅠ
識別序列 5′-GGATCC 5′-GAGCTC 5′-AAGCTT 5′-TCTAGA
回答下列問題:

(1)據(jù)圖分析,在TPS基因兩側(cè)引入的是
BamHⅠ、SacⅠ
BamHⅠ、SacⅠ
限制酶的酶切位點。設(shè)計的引物序列為
5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT
5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT
。
(2)在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)入目的基因時,需將TPS基因插入到質(zhì)粒的T-DNA中,原因是
T-DNA能轉(zhuǎn)移并整合到小麥染色體DNA上
T-DNA能轉(zhuǎn)移并整合到小麥染色體DNA上
。將攜帶了TPS基因的農(nóng)桿菌和小麥薄壁組織細(xì)胞共同培養(yǎng)時,需用酚類化合物對小麥細(xì)胞進(jìn)行處理,這種處理的作用是
吸引農(nóng)桿菌對小麥細(xì)胞進(jìn)行侵染
吸引農(nóng)桿菌對小麥細(xì)胞進(jìn)行侵染

(3)為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有TPS基因,基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入細(xì)胞后,在獲得的小麥植株葉片上涂抹
除草劑
除草劑
(填“除草劑”或“海藻糖“),篩選出抗除草劑個體。科學(xué)家將生長健壯、苗齡一致的抗除草劑小麥植株(實驗組)與非抗除草劑小麥植株(對照組)進(jìn)行培育,鑒定兩組個體之間的
海藻糖
海藻糖
(填“除草劑”或“海藻糖”)的含量,如果
實驗組積累的海藻糖明顯高于對照組
實驗組積累的海藻糖明顯高于對照組
,則說明獲得了細(xì)胞中積累了海藻糖的小麥優(yōu)質(zhì)品種。

【答案】BamHⅠ、SacⅠ;5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT;T-DNA能轉(zhuǎn)移并整合到小麥染色體DNA上;吸引農(nóng)桿菌對小麥細(xì)胞進(jìn)行侵染;除草劑;海藻糖;實驗組積累的海藻糖明顯高于對照組
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:3難度:0.6
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    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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