維生素A在體內轉化為11-順式視黃醛后，與視網膜特定細胞中的視蛋白結合成視紫紅質。視紫紅質接受光信號后，11-順式視黃醛轉變?yōu)槿词揭朁S醛，視紫紅質構象發(fā)生變化，激活細胞內的信號通路，最終產生視覺。全反式視黃醛與視蛋白脫離，經復雜的轉運和酶促反應，再度轉變?yōu)?1-順式視黃醛而被重復利用。最新研究表明，一種G蛋白偶聯受體RGR可能參與了視覺產生的某些過程。為研究RGR的作用機理，某研究小組利用基因工程培育出含RGR反義基因（反義基因是通過原基因反向連接在載體的啟動子和終止子之間，其轉錄出的mRNA與原基因轉錄出的mRNA互補配對）的轉基因小鼠（rgr），研究該基因的功能?；卮鹣铝袉栴}：

（1）為構建RGR反義基因重組載體，需先設計引物，通過PCR技術特異性擴增RGR反義基因。為使PCR產物能被限制酶切割，需在引物上添加相應的限制酶識別序列，即在引物A的

5′端

5′端

（填“3′端”或“5′端”）添加

BamHⅠ

BamHⅠ

限制酶識別序列，在引物B添加

EcoRⅠ

EcoRⅠ

限制酶識別序列。
（2）培養(yǎng)轉基因小鼠過程中，將基因表達載體導入受體細胞常用的方法是

顯微注射法

顯微注射法

，常用的受體細胞是

受精卵

受精卵

，選擇培養(yǎng)基中除有動物細胞培養(yǎng)的必需成分，還需要添加

四環(huán)素

四環(huán)素

起篩選作用。
（3）研究人員將正常小鼠（WT）和轉基因小鼠（rgr）都平均分成兩組，一組在黑暗中飼養(yǎng)12h,另一組在光照下飼養(yǎng)12h；隨后測定小鼠眼睛中11-順式視黃醛、全反式視黃醛和視紫紅質的含量，結果如圖3所示。據圖分析，光照條件下RGR的作用機理可能是

RGR通過促進全反式視黃醛轉化為11-順式視黃醛，進而增加視紫紅質的形成

RGR通過促進全反式視黃醛轉化為11-順式視黃醛，進而增加視紫紅質的形成

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