長(zhǎng)期高血糖可引發(fā)血管細(xì)胞衰老?？蒲腥藛T為研究S蛋白在因高血糖引發(fā)的血管細(xì)胞衰老中的治療效果，以腺病毒為載體將編碼S蛋白的S基因?qū)胙芗?xì)胞，實(shí)現(xiàn)S蛋白在血管細(xì)胞中的 大量表達(dá)。腺病毒由腺病毒DNA和腺病毒外殼蛋白構(gòu)成，其DNA復(fù)制需要其自身所攜帶的E₁、E₂、E₃基因共同完成?？蒲腥藛T通過(guò)基因編輯技術(shù)敲除了腺病毒DNA中的E₃基因，然后將S基因與腺病毒 DNA進(jìn)行重組，如圖1所示。在體外，將E₃基因?qū)肴梭w的干細(xì)胞，稱(chēng)之為A細(xì)胞（E₃基因可在A細(xì)胞內(nèi)正常表達(dá)）。然后把重組腺病毒DNA導(dǎo)入A細(xì)胞中。

（1）要鑒定重組腺病毒DNA是否導(dǎo)入A細(xì)胞，可采用的方法是用

標(biāo)記的S基因的單鏈DNA

標(biāo)記的S基因的單鏈DNA

作為探針進(jìn)行

DNA分子雜交

DNA分子雜交

。當(dāng)腺病毒DNA在導(dǎo)入A細(xì)胞后，通過(guò)DNA分子復(fù)制和

表達(dá)腺病毒外殼蛋白

表達(dá)腺病毒外殼蛋白

，從而最終組裝出大量完整的重組腺病毒。
（2）用含S基因的重組腺病毒分別感染正常人及糖尿病患者的血管細(xì)胞，使S蛋白在血管細(xì)胞中大量表達(dá)。對(duì)正常人、糖尿病患者及二者轉(zhuǎn)入S基因后血管細(xì)胞中能促進(jìn)細(xì)胞衰老的Ⅰ蛋白進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如圖2所示（條帶越寬代表Ⅰ蛋白表達(dá)量越高）?？捎?

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

方法檢測(cè) I 蛋白的表達(dá)量：實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示

糖尿病患者（或2組）

糖尿病患者（或2組）

血管細(xì)胞中 I 蛋白表達(dá)量最高，推測(cè) S 蛋白對(duì)高血糖引發(fā)的血管細(xì)胞衰老的作用及機(jī)制是

S蛋白通過(guò)降低Ⅰ蛋白的含量，抑制高血糖引發(fā)的血管細(xì)胞衰老

S蛋白通過(guò)降低Ⅰ蛋白的含量，抑制高血糖引發(fā)的血管細(xì)胞衰老

。
（3）結(jié)合上述信息，用該方法構(gòu)建的重組腺病毒進(jìn)行疾病治療，從生物安全性角度分析其優(yōu)點(diǎn)是

重組腺病毒進(jìn)入普通宿主細(xì)胞后，其DNA不能復(fù)制，從而不能產(chǎn)生子代來(lái)影響宿主細(xì)胞

重組腺病毒進(jìn)入普通宿主細(xì)胞后，其DNA不能復(fù)制，從而不能產(chǎn)生子代來(lái)影響宿主細(xì)胞

。（寫(xiě)出1點(diǎn)）