某研究團隊從沙漠野生檉柳中克隆出了一個耐鹽堿基因TcSR1。該團隊用限制酶BalⅡ切割目的基因TcSR1,用限制酶BamHⅠ切割質粒載體V3,兩種限制酶的識別序列及酶切位點如圖所示,經過體外重組和轉化,最終獲得了能夠在鹽堿地生長的楊樹新品種?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)使用限制酶BalⅡ和BamHⅠ切割得到的DNA片段末端均是 黏性黏性末端,用兩種酶分別切割目的基因和質粒載體V3后,再用 DNA連接DNA連接酶處理,以構建基因表達載體,質粒載體V3一般應具有 標記基因標記基因以供重組DNA的篩選。
(2)將目的基因導入楊樹細胞,最常采用的方法是 農桿菌轉化法農桿菌轉化法。若要檢測楊樹植株中目的基因TcSR1是否發(fā)生轉錄,可采用 分子雜交分子雜交技術,需要將 放射性同位素標記的基因TcSR1放射性同位素標記的基因TcSR1片段制成探針,通過檢測放射性達到目的。
(3)植物組織培養(yǎng)技術與基因工程技術相結合可獲得轉基因植株,將含有目的基因的細胞培養(yǎng)成一個完整植株的基本程序是 轉基因細胞脫分化愈傷組織再分化完整植物轉基因細胞脫分化愈傷組織再分化完整植物(用流程圖表示)。
脫分化
再分化
脫分化
再分化
【考點】基因工程的操作過程綜合;植物的組織培養(yǎng).
【答案】黏性;DNA連接;標記基因;農桿菌轉化法;分子雜交;放射性同位素標記的基因TcSR1;轉基因細胞愈傷組織完整植物
脫分化
再分化
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:8引用:2難度:0.6
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