透明質酸酶是一種能夠降低體內(nèi)透明質酸的活性,從而提高組織中液體滲透能力的酶。如圖是利用重疊延伸PCR技術獲得新透明質酸酶基因的過程,NcoⅠ和XhoⅠ為限制酶(箭頭所指為酶切位點)。請分析回答下列問題:
(1)圖中新透明質酸酶基因的獲得是重疊延伸PCR技術在 基因的定點突變基因的定點突變(填“基因敲除”“基因的定點突變”或”融合基因的構建”)方面的應用。透明質酸酶基因上的一段核苷酸序列為“-ATCTCGAGCGGG-”,則對該段核苷酸序列進行剪切的XhoⅠ識別的核苷酸序列(6個核苷酸)為
或
或
。
(2)構建透明質酸酶基因表達載體時,使用的載體往往有特殊的標記基因,其作用是 供重組DNA的鑒定和選擇供重組DNA的鑒定和選擇;所用的DNA連接酶對所連接的DNA兩端堿基序列 沒有沒有(填“有”或“沒有”)專一性要求。早期利用大腸桿菌作為受體細胞,后來發(fā)現(xiàn)毛霉或酵母菌更具優(yōu)勢,最可能的原因是 毛霉或酵母菌是真核細胞,有內(nèi)質網(wǎng)和高爾基體,可對合成的肽鏈進行加工毛霉或酵母菌是真核細胞,有內(nèi)質網(wǎng)和高爾基體,可對合成的肽鏈進行加工。
(3)鏈球菌等致病菌在侵染人體時,可產(chǎn)生透明質酸酶,試分析透明質酸酶在鏈球菌侵染過程中的作用:分解宿主細胞間質的主要成分(或分解宿主細胞間質的透明質酸)分解宿主細胞間質的主要成分(或分解宿主細胞間質的透明質酸),其意義可能是 破壞宿主的防御系統(tǒng),有利于致病菌入侵(或為細菌提供能源物質)破壞宿主的防御系統(tǒng),有利于致病菌入侵(或為細菌提供能源物質)。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】基因的定點突變;
或
;供重組DNA的鑒定和選擇;沒有;毛霉或酵母菌是真核細胞,有內(nèi)質網(wǎng)和高爾基體,可對合成的肽鏈進行加工;分解宿主細胞間質的主要成分(或分解宿主細胞間質的透明質酸);破壞宿主的防御系統(tǒng),有利于致病菌入侵(或為細菌提供能源物質)
【解答】
【點評】
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