干旱，鹽堿和凍害是限制植物生長發(fā)育的主要逆境因子，胚胎晚期豐富蛋白（LEA）是一類重要的植物細胞脫水保護蛋白，在抵御干旱等非生物脅迫過程中發(fā)揮著保護功能。科研工作者將擬南芥的LEA基因轉入小麥體內培育轉基因耐鹽品系小麥，以提高小麥的抗鹽堿性?；卮鹣铝袉栴}：
（1）為獲取LEA基因，可以從擬南芥細胞中提取總RNA，經過逆轉錄過程得到 cDNAcDNA，再利用 PCRPCR技術進行大量擴增。
（2）在體外人工擴增LEA基因的過程中，要控制反應體系的溫度變化。加熱至90～95℃的目的是 使DNA片段受熱變性解鏈為單鏈使DNA片段受熱變性解鏈為單鏈；隨后冷卻至55～60℃，再加熱至70～75℃的目的是 進行互補鏈的合成進行互補鏈的合成。
（3）構建基因表達載體是基因工程的核心，操作過程中用到的有關酶是 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。常用農桿菌轉化法將目的基因導入植物細胞，轉基因植物的基因組中含有目的基因片段，原因是 農桿菌Ti質粒上的T-DNA攜帶目的基因并將其轉移到受體細胞染色體的DNA上農桿菌Ti質粒上的T-DNA攜帶目的基因并將其轉移到受體細胞染色體的DNA上。
（4）為檢測轉基因小麥是否表達出了LEA，常用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交法進行檢測。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】cDNA；PCR；使DNA片段受熱變性解鏈為單鏈；進行互補鏈的合成；限制酶和DNA連接酶；農桿菌Ti質粒上的T-DNA攜帶目的基因并將其轉移到受體細胞染色體的DNA上；抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：4引用：3難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6