四尾柵藻具有環(huán)境適應(yīng)能力強和生長速度快等優(yōu)點，如果能將其進行品種改良，提高含油量，有望解決微藻生物柴油產(chǎn)業(yè)化進程的瓶頸。研究人員利用基因工程技術(shù)將油料作物紫蘇DGAT1基因?qū)胨奈矕旁?，獲得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油微藻，利用地熱廢水培養(yǎng)，不僅能生產(chǎn)生物柴油，還能治理地熱廢水。操作過程如下圖，請回答下列問題：
注：LacZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解物質(zhì)X-gal,從而使菌落顯現(xiàn)出藍色。若無該基因或該基因被破壞，則菌落呈白色。
（1）將質(zhì)粒pMD19-DGAT1導(dǎo)入大腸桿菌前，通常先用Ca2+處理大腸桿菌，使細胞處于一種 能吸收周圍環(huán)境中DNA分子能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
（2）圖中接種大腸桿菌的培養(yǎng)基pH一般為 中性或弱堿性中性或弱堿性。為了便于重組質(zhì)粒的篩選，該選擇培養(yǎng)基中應(yīng)添加 氨芐青霉素和X-gal氨芐青霉素和X-gal。導(dǎo)入 沒有連接目的基因的質(zhì)粒（或空質(zhì)粒；或pMD19質(zhì)粒）沒有連接目的基因的質(zhì)粒（或空質(zhì)粒；或pMD19質(zhì)粒）的大腸桿菌菌落成藍色，導(dǎo)入 重組質(zhì)粒（或pMD19-DGAT1質(zhì)粒）重組質(zhì)粒（或pMD19-DGAT1質(zhì)粒）的大腸桿菌菌落成白色。
（3）由上圖推測，用 BamHⅠBamHⅠ和 XbaⅠXbaⅠ酶切割pMD19-DGAT1獲得 DGAT1基因，并與酶切后的載體pBI121連接再次構(gòu)建基因表達載體，用這兩種酶切割的目的是 保證其準確插入質(zhì)粒并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問題（或防止反向連接和自身環(huán)化）保證其準確插入質(zhì)粒并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問題（或防止反向連接和自身環(huán)化）。
（4）為檢測轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對地熱廢水的去污能力，研究人員設(shè)計實驗并得到相應(yīng)實驗結(jié)果如表。
| 指標 | 總氮（mg/L） | 總磷（mg/L） | 氟化物（mg/L） |
| 廢水培養(yǎng)基 | 23.2 | 4.32 | 4.56 |
| 培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后 | 1.9 | 0.45 | 0.84 |
應(yīng)添加對照組：廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
應(yīng)添加對照組：廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】能吸收周圍環(huán)境中DNA分子；中性或弱堿性；氨芐青霉素和X-gal；沒有連接目的基因的質(zhì)粒（或空質(zhì)粒；或pMD19質(zhì)粒）；重組質(zhì)粒（或pMD19-DGAT1質(zhì)粒）；BamHⅠ；XbaⅠ；保證其準確插入質(zhì)粒并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問題（或防止反向連接和自身環(huán)化）；應(yīng)添加對照組：廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：32引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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