非細胞合成技術是一種運用合成生物學方法，在細胞外構建多酶催化體系，獲得目標產(chǎn)物的新技術，其核心是各種酶基因的挖掘、表達等。中國科學家設計了4步酶促反應的非細胞合成路線（如圖），可直接用淀粉生產(chǎn)肌醇（重要的醫(yī)藥食品原料），以期解決高溫強酸水解方法造成的嚴重污染問題，并可以提高產(chǎn)率。

回答下列問題：
（1）研究人員采用PCR技術從土壤微生物基因組中擴增得到目標酶基因。此外，獲得酶基因的方法還有

基因文庫中獲取和人工合成法

基因文庫中獲取和人工合成法

。（答出兩種即可）
（2）高質量的DNA模板是成功擴增出目的基因的前提條件之一。在制備高質量DNA模板時必須除去蛋白，方法有

鹽析法、酶解法或高溫變性法等

鹽析法、酶解法或高溫變性法等

。（答出兩種即可）
（3）研究人員使用大腸桿菌BL21作為受體細胞、pET20b為表達載體分別進行4種酶的表達。表達載體轉化大腸桿菌時，首先應制備

感受態(tài)

感受態(tài)

細胞。為了檢測目的基因是否成功表達出酶蛋白，需要采用的方法有

抗原-抗體雜交法

抗原-抗體雜交法

。
（4）依圖所示流程，在一定的溫度、pH等條件下，將4種酶與可溶性淀粉溶液混合組成一個反應體系。若這些酶最適反應條件不同，可能導致的結果是

有的酶失活而使反應中斷

有的酶失活而使反應中斷

。在分子水平上，可以通過改變

基因的堿基序列

基因的堿基序列

，從而改變蛋白質的結構，實現(xiàn)對酶特性的改造和優(yōu)化。