生態(tài)文明建設已成為我國的基本國策。水中雌激素類物質（E物質）污染會導致魚類雌性化等異常，并通過食物鏈影響人體健康和生態(tài)安全。原產南亞的斑馬魚，其肌細胞、生殖細胞等存在E物質受體，且幼體透明?？茖W家將綠色熒光蛋白（GFP）等基因轉入斑馬魚，建立了一種經(jīng)濟且快速的水體E物質監(jiān)測方法。
（1）將表達載體導入斑馬魚受精卵的最佳方式是

顯微注射

顯微注射

。
（2）為監(jiān)測E物質，研究者設計了如圖所示的兩種方案制備轉基因斑馬魚，其中ERE和酵母來源的UAS是兩種誘導型啟動子，分別被E物質-受體復合物和酵母來源的Gal4蛋白特異性激活，啟動下游基因表達。

與方案1相比，方案2的主要優(yōu)勢是

監(jiān)測靈敏度更高

監(jiān)測靈敏度更高

，因而被用于制備監(jiān)測魚（MO）。
現(xiàn)擬制備一種不育的監(jiān)測魚SM，用于實際監(jiān)測。SM需經(jīng)MO和另一親本（X）雜交獲得。欲獲得X，需從以下選項中選擇啟動子和基因，構建表達載體并轉入野生型斑馬魚受精卵，經(jīng)培育后進行篩選。請將選項的序號填入相應的方框中。
Ⅰ．啟動子：

①

①

。
①UAS
②ERE
③使基因僅在肌細胞表達的啟動子（P?。?br />④使基因僅在生殖細胞表達的啟動子（P生）
Ⅱ．基因：

C

C

。
A．Gal4
B．GFP
C．僅導致生殖細胞凋亡的基因（dg）
D．雌激素受體基因（ER）
（3）SM不育的原因是：成體SM自身產生雌激素，與受體結合后

激活ERE誘導Gal4表達，Gal4結合UAS誘導dg表達，生殖細胞凋亡

激活ERE誘導Gal4表達，Gal4結合UAS誘導dg表達，生殖細胞凋亡

造成不育。
（4）使擬用于實際監(jiān)測的SM不育的目的是

避免轉基因斑馬魚逃逸帶來生物安全問題

避免轉基因斑馬魚逃逸帶來生物安全問題

。