甘蔗線條花葉病毒（SCSMV）是引發(fā)甘蔗花葉病的主要病原之一，在世界各大甘蔗區(qū)普遍發(fā)生，嚴重威脅甘蔗產業(yè)的發(fā)展，如何建立快速有效的檢測方法對于該病毒的防控有著極為重要的意義。研究人員通過病株汁液提純得到病毒并以此制備抗體，由于不能完全排除寄主蛋白的影響，制備的抗體在檢測時易出現假陽性；改進科研方案后，研究人員利用基因工程和細胞工程技術制備出甘蔗線條花葉病毒（SCSMV）的P1蛋白的單克隆抗體，相關流程如圖1所示，圖2為pET28a質粒及P1基因結構示意圖。請回答下列問題。
?
（1）甘蔗線條花葉病毒是一種RNA病毒，可采取RT-PCR法獲得大量P1基因，該過程中需要用到的酶有 逆轉錄酶（將RNA逆轉錄為DNA）和TaqDNA聚合酶逆轉錄酶（將RNA逆轉錄為DNA）和TaqDNA聚合酶。
（2）圖1中，過程①需根據 P1兩端（3′端）核苷酸（或堿基）序列P1兩端（3′端）核苷酸（或堿基）序列設計特異性引物，還需在引物的5′端添加限制酶 Nco I和Sac INco I和Sac I的識別序列，確保P1基因正確插入啟動子與終止子之間，其目的是 保證P1基因能夠正確表達保證P1基因能夠正確表達。已知P1基因右端X處的堿基序列為5′-GAATAAAATACTAAAATCTTC-3′，則其中一個引物序列為5′-GAAGATTTTAGTATTTTATTCGAAGATTTTAGTATTTTATTC-3′（從5′端到3′端）。
（3）pET28a-P1CS載體可導入經 Ca2+Ca2+ 處理的大腸桿菌以提高轉化效率。該載體上存在調節(jié)基因，在大腸桿菌中可指導合成阻遏蛋白，阻遏蛋白與操縱基因結合，阻止 RNA聚合酶RNA聚合酶與啟動子結合，抑制P1基因的轉錄，其原理如圖3所示。分析圖3可知，需將轉化后的大腸桿菌接種在含 卡那霉素卡那霉素 的培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)，并從培養(yǎng)液中分離提純P1蛋白。
（4）圖1中的過程⑤目的是 使機體產生特異性的B淋巴細胞使機體產生特異性的B淋巴細胞，隨后可利用 聚乙二醇或滅活的病毒等聚乙二醇或滅活的病毒等誘導B細胞與骨髓瘤細胞融合，再進行篩選。獲得雜交瘤細胞后，在注入家兔腹腔前還應進行 專一抗體檢驗陽性和克隆化培養(yǎng)專一抗體檢驗陽性和克隆化培養(yǎng)。
【考點】基因工程的操作過程綜合；單克隆抗體及其應用．
【答案】逆轉錄酶（將RNA逆轉錄為DNA）和TaqDNA聚合酶；P1兩端（3′端）核苷酸（或堿基）序列；Nco I和Sac I；保證P1基因能夠正確表達；GAAGATTTTAGTATTTTATTC；Ca2+；RNA聚合酶；卡那霉素；使機體產生特異性的B淋巴細胞；聚乙二醇或滅活的病毒等；專一抗體檢驗陽性和克隆化培養(yǎng)
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有，未經書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/7/17 8:0:9組卷：16難度：0.5
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7