利用基因工程獲取人干擾素-α的方法有兩種:一是將IFN-α基因導入細菌,從細胞外分離獲??;二是將IFN-α基因導入畢赤酵母菌,結合現(xiàn)代工藝從細胞內(nèi)獲取。請回答:
(1)基因工程中構建的表達載體一般包括 復制原點復制原點、標記基因、啟動子序列、目的基因和終止子序列。其中標記基因的作用是 篩選重組質粒篩選重組質粒,啟動子是 RNA聚合RNA聚合酶的結合位點。
(2)微生物代謝中合成用于自身生長發(fā)育的物質稱為初級代謝產(chǎn)物,隨后產(chǎn)生并分泌到細胞外的生物堿、抗菌素及細菌毒素稱為次級代謝產(chǎn)物。將IFN-α基因導入細胞,由于缺少細胞器 內(nèi)質網(wǎng)內(nèi)質網(wǎng)參與肽鏈的加工導致表達的干擾素-α無糖鏈結構;從產(chǎn)物角度分析,將該基因導入酵母菌與導入細菌相比獲得的抗生素更純且活性更高的原因有 細胞內(nèi)合成不需要分泌到細胞外;避免細菌毒素的副作用細胞內(nèi)合成不需要分泌到細胞外;避免細菌毒素的副作用。(答兩點)。
(3)畢赤酵母菌在發(fā)酵罐中具有高密度的特點,下圖示營養(yǎng)比例及氧氣含量對酵母菌產(chǎn)干擾素-α的影響結果。
①酵母菌培養(yǎng)基中的蛋白粉被用作 氮源氮源。
②5%O2條件下,后期干擾素-α合成量急劇下降的原因可能是 酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精毒害酵母菌。制備酵母培養(yǎng)基的過程中,除了配制相關的營養(yǎng)成分外,還需要 適宜的溫度和pH適宜的溫度和pH保證酶的活性。生產(chǎn)上為節(jié)約成本,一般在發(fā)酵的后期可通過補充 適當比例的碳源和氮源適當比例的碳源和氮源并適當 通入純凈空氣通入純凈空氣。
【答案】復制原點;篩選重組質粒;RNA聚合;內(nèi)質網(wǎng);細胞內(nèi)合成不需要分泌到細胞外;避免細菌毒素的副作用;氮源;酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精;適宜的溫度和pH;適當比例的碳源和氮源;通入純凈空氣
【解答】
【點評】
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