體細(xì)胞核移植技術(shù)雖然展現(xiàn)出廣泛的應(yīng)用前景，但效率低下制約了該項(xiàng)技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用。研究發(fā)現(xiàn)精子中的一些非遺傳物質(zhì)對(duì)早期胚胎發(fā)育至關(guān)重要，這些物質(zhì)的缺失可能是導(dǎo)致核移植胚胎發(fā)育異常的一個(gè)重要原因。某研究團(tuán)隊(duì)分離了牛精子中的小分子非編碼RNA（miRNA），并將其注核移植胚胎，進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖1圖2所示。

（1）該團(tuán)隊(duì)選用的供體核來自于1周齡荷斯坦小牛的皮膚成纖維細(xì)胞，選用幼齡動(dòng)物細(xì)胞的原因是

幼齡動(dòng)物細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，細(xì)胞分裂旺盛；細(xì)胞分化程度低，細(xì)胞核的全能性容易表現(xiàn)出來

幼齡動(dòng)物細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，細(xì)胞分裂旺盛；細(xì)胞分化程度低，細(xì)胞核的全能性容易表現(xiàn)出來

。將動(dòng)物組織用

胰蛋白

胰蛋白

酶處理后，放入5% CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3～5代后使用，培養(yǎng)箱中添加CO₂的主要作用是

維持培養(yǎng)液的pH

維持培養(yǎng)液的pH

。
（2）從牛卵巢中獲取卵母細(xì)胞，并在體外培養(yǎng)至

MⅡ

MⅡ

期，通過顯微操作對(duì)其進(jìn)行

去核

去核

處理，然后將供體細(xì)胞注入，獲得重構(gòu)胚。
（3）將精子miRNA注入到重構(gòu)胚中作為實(shí)驗(yàn)組，檢測胚胎的細(xì)胞凋亡率，結(jié)果如圖1所示，其中對(duì)照組1為體外受精獲得的胚胎，對(duì)照組2的胚胎應(yīng)為

未注入精子miRNA的重構(gòu)胚

未注入精子miRNA的重構(gòu)胚

。由圖可知，精子mRNA對(duì)胚胎細(xì)胞凋亡的影響是

精子miRNA可減少細(xì)胞凋亡

精子miRNA可減少細(xì)胞凋亡

。
（4）研究表明細(xì)胞骨架蛋白α-tubulin與胚胎細(xì)胞的凋亡有關(guān)，進(jìn)一步檢測三組胚胎第一次卵裂期間細(xì)胞骨架蛋白α-tubulin乙酰化水平結(jié)果如圖2所示。據(jù)此推測精子miRNA可提高胚胎發(fā)育成活率的原因可能是

精子miRNA可通過提高細(xì)胞骨架蛋白α-tubulin-乙?；?，降低胚胎細(xì)胞凋亡率

精子miRNA可通過提高細(xì)胞骨架蛋白α-tubulin-乙酰化水平，降低胚胎細(xì)胞凋亡率

。