PCR已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室里的一種常規(guī)技術(shù),其原理是利用DNA的半保留復(fù)制,在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖)。該技術(shù)可在很短的時(shí)間內(nèi),將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍,使實(shí)驗(yàn)所需要的遺傳物質(zhì)可從生物體外獲得。
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(1)加熱至94℃可使DNA雙鏈打開,這一步是打開 氫氫鍵,這一過程稱為 變性變性。
(2)當(dāng)溫度降低時(shí),引物與模板的 3′3′端結(jié)合,在耐高溫的DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最終合成兩個(gè)DNA分子,此過程中原料是 四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸,遵循的原則是 堿基互補(bǔ)配對原則堿基互補(bǔ)配對原則。
(3)PCR技術(shù)的必要條件,除了模板、引物、原料、酶,至少還需要三個(gè)條件,即液體環(huán)境、適宜的 溫度溫度和 酸堿度/pH酸堿度/pH,前者由PCR儀自動調(diào)控,后者則靠 緩沖液緩沖液來維持。
(4)在PCR反應(yīng)過程中,DNA的復(fù)制需要引物,其主要原因是 DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3′端延伸DNA鏈DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3′端延伸DNA鏈。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】氫;變性;3′;四種脫氧核苷酸;堿基互補(bǔ)配對原則;溫度;酸堿度/pH;緩沖液;DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3′端延伸DNA鏈
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/7/9 8:0:8組卷:2引用:3難度:0.5
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1.科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力,利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題:
(1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
(2)PCR過程所依據(jù)的原理是
(3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為
(4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是
A.選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B.采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C.人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克?。?,可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6 -
2.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
A.應(yīng)根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計(jì)兩種引物 B.PCR每一循環(huán)包括變性、復(fù)性和延伸三個(gè)過程 C.PCR結(jié)束后有靶分子的反應(yīng)單位能檢測出熒光 D.每個(gè)反應(yīng)單位中都需要加入解旋酶和耐高溫DNA聚合酶 發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:7引用:2難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>
A.在凝膠中DNA分子的遷移速率主要和DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān) B.凝膠中DNA分子通過染色,可以在波長300nm的紫外燈下被檢測出來 C.該實(shí)驗(yàn)用到的緩沖液和酶,使用前為加快融化速度,從冰箱取出直接水浴加熱 D.電泳技術(shù)可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關(guān)系的鑒定 發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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