COVID-19的抗原性與感染性與其表面的S蛋白(刺突糖蛋白)密切相關(guān),現(xiàn)利用基因工程的方法生產(chǎn)相關(guān)疫苗。圖甲為構(gòu)建S蛋白基因表達(dá)載體的過(guò)程,圖乙為重組質(zhì)粒被相關(guān)酶切后的電泳結(jié)果。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

(1)①過(guò)程所使用的酶為 逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶,為保證PCR技術(shù)擴(kuò)增S蛋白基因正常進(jìn)行,該反應(yīng)體系的主要成分有 模板DNA、dNTP、引物、Taq酶模板DNA、dNTP、引物、Taq酶。PCR技術(shù)中低溫復(fù)性的目的是 引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈。
(2)通過(guò)PCR技術(shù)可在cDNA分子中專一性擴(kuò)增出S蛋白基因,其原因是 引物是根據(jù)S蛋白基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的引物是根據(jù)S蛋白基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的。PCR過(guò)程經(jīng)過(guò)4次循環(huán),需要的引物的數(shù)量是 3030個(gè)。
(3)構(gòu)建好的重組質(zhì)粒長(zhǎng)度共2000bp,用限制酶HindⅢ及限制酶HindⅢ和BamHⅠ分別對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行切割并電泳,結(jié)果如圖乙所示,可推測(cè)BamHⅠ在重組質(zhì)粒上有 33個(gè)酶切位點(diǎn)。為使S蛋白基因在受體細(xì)胞中高效表達(dá),需要把S蛋白基因正確插入重組質(zhì)粒的 啟動(dòng)子和終止子啟動(dòng)子和終止子之間。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定;基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶;模板DNA、dNTP、引物、Taq酶;引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈;引物是根據(jù)S蛋白基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的;30;3;啟動(dòng)子和終止子
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:1難度:0.4
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發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:7引用:2難度:0.6 -
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發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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