研究發(fā)現(xiàn),H5亞型禽流感病毒能突破種間屏障感染人類。科研人員針對人流感病毒H3以及禽流感病毒H5進行了相關研究?;卮鹣铝袉栴}:
(1)科研人員要通過PCR擴增兩種病毒的DNA前,首先要通過兩種病毒的RNA得到兩種病毒的DNA,這一步驟所需的關鍵酶是 逆轉錄酶逆轉錄酶。PCR技術擴增DNA的過程中,復性是指 當溫度下降到50℃左右,兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合當溫度下降到50℃左右,兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合。PCR中需要添加引物的原因是 DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3′端(子鏈的5′端)開始延伸DNADNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3′端(子鏈的5′端)開始延伸DNA。
(2)研究人員利用p質粒構建p-H5/H3共表達的重組質粒(如圖),設計思路是:先將H5基因整合到p質粒(僅含有NheⅠ和XhoⅠ酶切位點)上,再將H3基因插入,獲得重組質粒。為達到實驗目的,需要在目的基因兩端引入酶切位點,在H5基因兩端需要引入哪些酶切位點?NheⅠ、ClaⅠ、XhoⅠNheⅠ、ClaⅠ、XhoⅠ。
(3)重組質粒p-H5/H3中的啟動子是 RNA聚合RNA聚合酶識別和結合的部位,能驅動基因轉錄出mRNA。除圖中所示的組成外,重組質粒p-H5/H3中還應有 終止子、標記基因終止子、標記基因等(至少答兩個)。
(4)研究人員將重組質粒p-H5/H3直接導入人或動物體內,讓其在宿主細胞中表達出抗原蛋白,不斷進行體液免疫和細胞免疫,達到預防的目的。上述研究表明,通過將 多個抗原基因插入同一個質粒中多個抗原基因插入同一個質粒中,可以實現(xiàn)一種基因疫苗預防多種疾病的目的。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】逆轉錄酶;當溫度下降到50℃左右,兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合;DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3′端(子鏈的5′端)開始延伸DNA;NheⅠ、ClaⅠ、XhoⅠ;RNA聚合;終止子、標記基因;多個抗原基因插入同一個質粒中
【解答】
【點評】
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