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HI8L是宮頸癌病毒(一種DNA病毒)特有的蛋白??蒲腥藛T利用轉基因技術在植物細胞中表達H18L用于研究。研究發(fā)現(xiàn),不同植物翻譯時會有偏好的密碼子,若提高H18L基因中編碼受體細胞偏好的密碼子序列比例,將大幅度提高翻譯效率。為實現(xiàn)上述目的,需要對H18L基因序列進行改造。原理如圖所示。
步驟一:

步驟二:

回答下列問題:
(1)步驟一:將預期的堿基序列設計在PCR的引物中,制備出PCR“體系1”和“體系2”,分別進行PCR擴增。
①補全下表中的兩個PCR體系的成分。
成分 PCR體系1 PCR體系2
模板
H18L基因
H18L基因
引物 a和b c和d
耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)
耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)
其他成分 四種脫氧核苷酸、 緩沖液等
②PCR擴增時,引物b、c與體系中加入的模板
部分結合
部分結合
(填“完全結合”或“部分結合”)。
(2)步驟二:將體系1、2的產(chǎn)物(即圖中的ef和gh)混合后,繼續(xù)進行下一次PCR反應。在該PCR反應體系中經(jīng)過高溫變性后,當溫度下降到50℃,能夠互補配對的DNA鏈相互結合,理論上有
4
4
種結合的可能,其中能進行進一步延伸的有
1
1
種。
(3)步驟二的最終產(chǎn)物即為優(yōu)化后的H18L基因序列,其長度為
942
942
bp。用
BamHⅠ和Xhol
BamHⅠ和Xhol
限制酶處理該序列和載體,構建表達載體。再用
農桿菌轉化
農桿菌轉化
法將該載體轉人植物的愈傷組織,生產(chǎn)H18L蛋白。
(4)上述實驗中,利用引物設計實現(xiàn)了哪些實驗目的?(請寫出兩條)

【答案】H18L基因;耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶);部分結合;4;1;942;BamHⅠ和Xhol;農桿菌轉化
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:73引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.通過設計引物,運用PCR技術可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程,其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對,但不影響引物與模板鏈的整體配對,反應體系中引物1和引物2的5′端分別設計增加限制酶a和限制酶b的識別位點。有關敘述正確的是(  )

    發(fā)布:2024/11/19 10:30:1組卷:117引用:5難度:0.7
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    ①dCTP,dGTP,dATP
    ②dGTP,dATP,dTTP,dCTP
    ③α位被32P標記的ddTTP
    ④γ位被32P標記的ddTTP

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:27引用:1難度:0.6
  • 3.目前研究混雜DNA群體中的特異DNA序列,一般基于兩種不同的方法,即DNA克隆和DNA分子雜交,如圖所示。下列有關敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/22 4:0:1組卷:22引用:2難度:0.6
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