某科研人員從蘇云金芽孢桿菌中獲取BT毒蛋白基因,并將其導入大豆葉肉細胞,培育出抗蟲的轉(zhuǎn)基因大豆,主要過程如下?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)質(zhì)粒上存在潮霉素抗性基因的目的是 檢測目的基因是否導入受體細胞,從而將含有目的基因的細胞篩選出來檢測目的基因是否導入受體細胞,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。
(2)過程①表示利用PCR獲取BT毒蛋白基因,其前提是 根據(jù)BT毒蛋白基因兩端的核苷酸序列合成引物根據(jù)BT毒蛋白基因兩端的核苷酸序列合成引物;在BT毒蛋白基因兩側分別添加HindⅢ和BamHI限制酶序列,其目的是 讓BT毒蛋白基因與質(zhì)粒定向連接讓BT毒蛋白基因與質(zhì)粒定向連接。
(3)過程①中BT毒蛋白基因連續(xù)擴增5次,形成 3232個BT毒蛋白基因片段,需要 6262個引物。
(4)過程②構建重組質(zhì)粒時,將BT毒蛋白基因插入啟動子和終止子之間的原因是 保證BT毒蛋白基因能夠在大豆細胞中表達保證BT毒蛋白基因能夠在大豆細胞中表達。
(5)將重組質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌時,需要用 Ca2+Ca2+處理農(nóng)桿菌,使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。過程③篩選具有抗蟲能力的大豆,從分子水平上檢測BT毒蛋白基因是否表達的方法是 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】檢測目的基因是否導入受體細胞,從而將含有目的基因的細胞篩選出來;根據(jù)BT毒蛋白基因兩端的核苷酸序列合成引物;讓BT毒蛋白基因與質(zhì)粒定向連接;32;62;保證BT毒蛋白基因能夠在大豆細胞中表達;Ca2+;抗原—抗體雜交
【解答】
【點評】
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