新冠病毒為RNA病毒,其表面的S蛋白能刺激人體產(chǎn)生中和抗體。CHO-GS細胞是生產(chǎn)S蛋白的工程細胞,該細胞缺少谷氨酰胺合成酶基因(GS基因),在缺少谷氨酰胺的基本培養(yǎng)基上不能生長?;卮鹣铝袉栴}:
(1)以新冠病毒的RNA為模板,通過RT-PCR獲取S基因(DNA)時需要特異性的引物,該引物的作用是 使DNA聚合酶能從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸,RT-PCR過程所需的酶主要有 逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶。
(2)構(gòu)建目的基因表達載體時,在啟動子和終止子間需要插入S基因和 GSGS基因,篩選含S基因的CHO-GS細胞時所用的選擇培養(yǎng)基為 缺少谷氨酰胺的基本培養(yǎng)基缺少谷氨酰胺的基本培養(yǎng)基。
(3)用CHO-GS細胞生產(chǎn)S蛋白時,除培養(yǎng)基成分外,影響細胞生長和S蛋白表達的環(huán)境條件還有 無菌無毒環(huán)境、溫度、氣體環(huán)境(含5%CO2的空氣)、pH無菌無毒環(huán)境、溫度、氣體環(huán)境(含5%CO2的空氣)、pH。經(jīng)分離提純后的S蛋白可用于 制作新冠(重組蛋白)疫苗、用于新冠抗體檢測制作新冠(重組蛋白)疫苗、用于新冠抗體檢測。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】使DNA聚合酶能從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸;逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶;GS;缺少谷氨酰胺的基本培養(yǎng)基;無菌無毒環(huán)境、溫度、氣體環(huán)境(含5%CO2的空氣)、pH;制作新冠(重組蛋白)疫苗、用于新冠抗體檢測
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/11/11 8:30:2組卷:10引用:4難度:0.6
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