回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題:科研人員培育出了抗凍甘薯,圖為培育過(guò)程使用的是Ti質(zhì)粒。
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(1)為增強(qiáng)甘薯的抗凍能力,科研人員將北極海魚(yú)的抗凍基因通過(guò)農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌成功導(dǎo)入完整的甘薯細(xì)胞,此過(guò)程中需要先將抗凍基因接入Ti質(zhì)粒的T-DNAT-DNA區(qū)域。
(2)Vir區(qū)的基因活化后,能作用于T-DNA的加工和轉(zhuǎn)移,因此構(gòu)建重組DNA分子時(shí),選擇的限制酶最好是ⅢⅢ(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),不選其它兩種的理由是限制酶Ⅰ會(huì)破壞四環(huán)素抗性基因影響后續(xù)的篩選,限制酶Ⅱ會(huì)破壞Vir區(qū)基因影響目的基因的轉(zhuǎn)移限制酶Ⅰ會(huì)破壞四環(huán)素抗性基因影響后續(xù)的篩選,限制酶Ⅱ會(huì)破壞Vir區(qū)基因影響目的基因的轉(zhuǎn)移。
(3)為篩選成功導(dǎo)入抗凍基因的甘薯細(xì)胞,可在培養(yǎng)基添加四環(huán)素四環(huán)素,也可在低溫低溫條件下培養(yǎng)植物細(xì)胞。
(4)將含有抗凍基因的甘薯細(xì)胞脫分化形成愈傷組織后,液體懸浮培養(yǎng)成胚性細(xì)胞胚性細(xì)胞,進(jìn)而啟動(dòng)胚胎發(fā)生胚胎發(fā)生途徑得到抗凍甘薯植株。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】農(nóng)桿菌;T-DNA;Ⅲ;限制酶Ⅰ會(huì)破壞四環(huán)素抗性基因影響后續(xù)的篩選,限制酶Ⅱ會(huì)破壞Vir區(qū)基因影響目的基因的轉(zhuǎn)移;四環(huán)素;低溫;胚性細(xì)胞;胚胎發(fā)生
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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